屠宰場(chǎng)非洲豬瘟檢測(cè)PCR實(shí)驗(yàn)室建造設(shè)計(jì)指南
發(fā)布時(shí)間：2019-10-10 閱讀：263次
關(guān)于豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的建造問題你了解多少呢？以下是屠宰場(chǎng)非洲豬瘟檢測(cè)PCR實(shí)驗(yàn)室建造設(shè)計(jì)指南，希望能夠?qū)Υ蠹矣兴鶐椭?/span>
一、什么是 PCR 實(shí)驗(yàn)室
PCR 是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)也可以 當(dāng)作一項(xiàng)其重要的酶促合成 DNA 技術(shù)。PCR 又稱為無(wú)細(xì)胞克隆系統(tǒng)或特異性 DNA 序列體外引物定向酶促擴(kuò)增法，是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新，它可將微量的靶 DNA 特異地?cái)U(kuò)增 上百萬(wàn)倍。
聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）是在 DNA 聚合酶催化下，以母鏈 DNA 為模板以特定引物為延伸起
點(diǎn)，通過變性、退火、延伸等步驟，體外復(fù)制出與母鏈模板 DNA 互補(bǔ)的子鏈 DNA 的過程。是 一項(xiàng) DNA 體外合成放大技術(shù)，能快速特異地在體外擴(kuò)增任何目的 DNA?？捎糜诨蚍蛛x克隆，序列分析，基因表達(dá)調(diào)控，基因多態(tài)性研究等許多方面。
一對(duì)合成 DNA 的引物經(jīng)過高溫變性、低溫退火和中溫延伸三個(gè)階段為一個(gè)循環(huán),每一次循環(huán)使特異區(qū)段的基因拷貝數(shù)放大一倍,一般樣品是經(jīng)過 30 次循環(huán),終使基因放大了數(shù)百萬(wàn)倍; 將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳,經(jīng)溴化乙錠染色,在紫外燈照射下肉眼能見到擴(kuò)增特異區(qū)段的 DNA 帶。
二、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則
1、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的選址：
符合檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)規(guī)定，具體適用于屠宰場(chǎng)來說，可選擇辦公樓或者的實(shí)驗(yàn)室空間，選址不能和屠宰線相通，如果實(shí)驗(yàn)室陽(yáng)性對(duì)照污染，會(huì)污染整個(gè)屠宰生產(chǎn)線，勢(shì)必對(duì)屠宰場(chǎng)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
個(gè)別不專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造公司因?yàn)椴涣私夥侵挢i瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)流程，造成設(shè)計(jì)布局不合理，對(duì)后期開展工作造成很大的不便及生物安全隱患。
2、主體結(jié)構(gòu)：
目前實(shí)驗(yàn)室的主體多為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金R50內(nèi)角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。并且彩鋼板結(jié)構(gòu)牢固，線條簡(jiǎn)明，美觀大方，密封性好。
3、標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：
將 PCR 過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和 PCR 擴(kuò)增區(qū)及產(chǎn)物分析檢測(cè)區(qū)四個(gè)的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時(shí)各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)， 使整個(gè) PCR 實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
另外：
PCR 實(shí)驗(yàn)室根據(jù)使用儀器的功能合理設(shè)置各個(gè)工作區(qū)域，如采用聚合酶聯(lián)反應(yīng)：則設(shè)置試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域，這是
常用的分區(qū)方式。樣品需要粉碎處理的，還需增設(shè)樣品粉碎區(qū)；若使用實(shí)時(shí)熒光 PCR 法：基因擴(kuò)增區(qū)、基因產(chǎn)物分析區(qū)可以合并在一個(gè)房間內(nèi)；采用標(biāo)本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的全自動(dòng)化 PCR 分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個(gè)區(qū)域，因此 PCR 實(shí)驗(yàn)室原則上設(shè)置五個(gè)區(qū)或四個(gè)區(qū)或三個(gè)區(qū)或二個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)。
核酸擴(kuò)增前區(qū)和核酸擴(kuò)增后區(qū)可設(shè)在一個(gè)房間內(nèi)，但必須在滿足下列要求的前提下：
a. 核酸擴(kuò)增前區(qū)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)置兩個(gè)不同位置的實(shí)驗(yàn)區(qū)，試劑配置在超凈工作臺(tái)中操作，樣品處理在生物安全柜內(nèi)操作。
b. 在核酸擴(kuò)增后區(qū)使用全封閉的擴(kuò)增和檢測(cè)系統(tǒng)，如實(shí)時(shí)熒光 PCR 儀等。
c. 每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員使用各自的試劑、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。
d. 在實(shí)驗(yàn)前后對(duì)操作區(qū)域和共享器具進(jìn)行清潔及消毒。
e. 各區(qū)域的試劑、器具、儀器和設(shè)備為該區(qū)專用，不得交叉使用。
4、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的布局：
非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室用的儀器為熒光定量PCR，因此核酸擴(kuò)增和分析在一個(gè)區(qū)，實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)需要如下功能房間：PCR緩存走廊、帶緩存間的配液室、帶緩存間的樣品處理室、帶緩存間的核酸擴(kuò)增分析區(qū)及實(shí)驗(yàn)室用具消毒室。
5、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室生物安全保護(hù)：
理論上講非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室是BSL-2 生物安全實(shí)驗(yàn)室，需要配置二級(jí)生物安全柜，推薦選擇70%外排，30%內(nèi)循環(huán)，各功能房間緩存設(shè)置衣柜和消毒器，各區(qū)的實(shí)驗(yàn)服專用，物料流通需要配置帶紫外線的互鎖的傳遞窗，實(shí)行人流物流分開設(shè)置。
6、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室消毒：
在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。
在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈，對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。
7、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗：
試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過程中不受污染（人物分流）。
8、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室地面
地面建議使用 PVC 卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少 800mm×800mm）接縫需要小于 2mm。
9、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室照明
燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。
三、空氣流與壓差要求
PCR 實(shí)驗(yàn)室的空氣流向必須嚴(yán)格按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進(jìn)行，防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。風(fēng)速流向不得混亂。
為了保證房間內(nèi)的壓差和避免污染，應(yīng)在空調(diào)面板處寫清楚送風(fēng)機(jī)和排風(fēng)機(jī)的開啟順序和關(guān)閉順序，先后順序不得混亂。
空氣潔凈級(jí)別不同的相鄰房間之間的靜壓差應(yīng)大于 5 帕，潔凈室(區(qū))與室外大氣的靜壓差應(yīng)大于 10 帕，應(yīng)配備監(jiān)測(cè)靜壓差的設(shè)備，并定期監(jiān)控。
一般情況下，試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染；可以通過控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。
核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。
在理想情況下，PCR 實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。PCR 實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制的要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到定點(diǎn)。
四、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施要求：
實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)施設(shè)計(jì)：包括實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)裝修、實(shí)驗(yàn)室凈化工程、實(shí)驗(yàn)室供排水工程、實(shí)驗(yàn)室電路系統(tǒng)。
1、實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)裝修需要潔凈天花、地板、隔斷，合理設(shè)置緩存間及配置凈化門、觀察窗、傳遞窗等。
2、實(shí)驗(yàn)室凈化工程 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備單獨(dú)送排風(fēng)設(shè)施，試劑配置區(qū)、核酸提取區(qū)和擴(kuò)增分析區(qū)應(yīng)配備凈化系統(tǒng)。
3、實(shí)驗(yàn)室供排水工程包括非手動(dòng)水龍頭、不銹鋼或PP水池和緊急淋浴器及供排水管線管路。
4、實(shí)驗(yàn)室電路系統(tǒng):根據(jù)儀器的功率配置合適的功率，特別注意高壓滅菌鍋的功率，注意實(shí)驗(yàn)室用電安全。
5、配備適用的應(yīng)急器材，如應(yīng)急照明設(shè)備、消防器材、意外事故處理器材等。
五、實(shí)驗(yàn)室儀器及設(shè)備
1、衣室儀器及設(shè)備：衣柜或掛衣架、鞋柜以及消毒器和烘干器。
2、配液室儀器及設(shè)備：超凈工作臺(tái)、冰箱、小型離心機(jī)、旋渦振蕩器、微量移液器等。
3、樣品處理室儀器及設(shè)備：離心機(jī)、組織研磨機(jī)、Ⅱ級(jí)生物安全柜、恒溫水浴鍋、冰柜等、可移動(dòng)紫外消毒器。
4、核酸提取室儀器及設(shè)備：核酸提取儀、Ⅱ級(jí)生物安全柜、恒溫水浴鍋、小型離心機(jī)、微量移液器、可移動(dòng)紫外消毒器等。
5、擴(kuò)增分析區(qū)儀器及設(shè)備：熒光定量pcr儀、電腦、打印機(jī)、不間斷電源、可移動(dòng)紫外消毒器等。
6、消毒洗滌室：高壓滅菌器、干燥箱、器皿柜等。
六、實(shí)驗(yàn)室面積及設(shè)備間距
一般來說各房間的面積沒有嚴(yán)格要求，只需能放置所需儀器設(shè)備，并且便于人員操作即可，但是有生物安全柜的房間面積不能小于10平米，并且每增加一臺(tái)生物安全柜，房間就要增加 10 平米。各實(shí)驗(yàn)室緩沖間的面積一般為 1300*（1300 或 1500）mm 為宜，并且緩沖間的面積不能 大于實(shí)驗(yàn)室房間面積的 1/8。
在做平面設(shè)計(jì)的時(shí)候，先要考慮的因素是就是“安全”，實(shí)驗(yàn)室是易發(fā)生爆炸、火災(zāi)、毒氣泄露等的場(chǎng)所。我們?cè)谧銎矫嬖O(shè)計(jì)的時(shí)候，應(yīng)盡量地要保持實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)流暢、逃生通道暢通。根據(jù)人體工程學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)。我們做如下的劃分以供參照：
實(shí)驗(yàn)臺(tái)與實(shí)驗(yàn)臺(tái)通道劃分標(biāo)準(zhǔn)(通道間隔用 L 表示)
L>500mm 時(shí)，一邊可站人操作；
L>800mm 時(shí)，一邊可坐人操作；
L>1200mm 時(shí)，一邊可坐人，一邊可站人，中間不可過人;
L>1500mm 時(shí)，兩邊可坐人，中間可過人；
L>1800mm 時(shí)，兩邊可坐人，中間可過人可過儀器
天平臺(tái)、儀器臺(tái)不宜離墻太近，離墻 400mm 為宜。為了在工作發(fā)生危險(xiǎn)時(shí)易于疏散，實(shí)驗(yàn)臺(tái)間的過道應(yīng)全部通向走廊。另:實(shí)驗(yàn)室建筑層高宜為 3.7 米-4.0 米為宜，凈高宜為2.7米-2.8 米，有潔凈度、壓力梯度、恒溫恒濕等特殊要求的實(shí)驗(yàn)室凈高宜為 2.5 米-2.7 米（不包括吊頂）；實(shí)驗(yàn)室走廊凈寬宜為 2.5 米-3.0 米.普通實(shí)驗(yàn)室雙門寬以 1.1 米-1.5 米(不對(duì)稱對(duì)開門)為宜,單門寬以 0.8 米-0.9 米為宜。
七、潔凈裝修要求
潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表面應(yīng)平整光滑、無(wú)裂縫、接口嚴(yán)密、無(wú)顆粒物脫落，并能耐受清洗
和消毒，墻壁與地面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少灰塵積聚和便于清潔。
潔凈室(區(qū))內(nèi)各種管道、燈具、風(fēng)口以及其他公用設(shè)施，在設(shè)計(jì)和安裝時(shí)應(yīng)考慮使用中
避免出現(xiàn)不易清潔的部位。
潔凈室(區(qū))的窗戶、天棚及進(jìn)入室內(nèi)的管道、風(fēng)口、燈具與墻壁或天棚的連接部位均應(yīng)
密封。
八、人流路徑與物流路徑
進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑：
公共清潔區(qū)——衣間（換潔凈服）——緩沖間——污染實(shí)驗(yàn)區(qū)
工作人員退出實(shí)驗(yàn)室的路徑為：
污染試驗(yàn)區(qū)——緩沖間——淋浴間（有條件的可設(shè)置）——衣間——公共清潔區(qū)
所有的物品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)必須經(jīng)過雙扉互鎖傳遞窗，利用傳遞窗消毒后才可進(jìn)入，實(shí)驗(yàn)室
內(nèi)所有物品的也必須經(jīng)過傳遞窗才可以傳遞到實(shí)驗(yàn)室以外的清潔公共區(qū)。
門的開啟方向
實(shí)驗(yàn)室建筑層高宜為 3.7 米-4.0 米為宜，PCR 實(shí)驗(yàn)室凈高宜為 2.5 米-2.7 米（不包括吊頂）；實(shí)驗(yàn)室走廊凈寬宜為 2.5 米-3.0 米.普通實(shí)驗(yàn)室雙門寬以 1.1 米-1.5 米(不對(duì)稱對(duì)開門)為宜,單門寬以 0.8 米-0.9 米為宜。
一般實(shí)驗(yàn)室門主要向里開，但如有危險(xiǎn)的房間，房門應(yīng)朝外開，房門材質(zhì)好選擇壓力
玻璃。
有壓差梯度的房間，門的開啟方向應(yīng)朝向正壓方向一側(cè)開啟；
考慮到消防安全，對(duì)于那些主要逃生門的開啟方向應(yīng)朝向清潔區(qū)方向開啟。
九、工作服要求
在凈化車間內(nèi)工作的人員應(yīng)穿著符合要求的工作服。工作服的選材、式樣及穿戴方式應(yīng)與生產(chǎn)操作和空氣潔凈度級(jí)別要求相適應(yīng)，并不得混用。潔凈工作服的質(zhì)地應(yīng)光滑、不產(chǎn)生靜電、不脫落纖維和顆粒性物質(zhì)。無(wú)菌工作服必須包蓋全部毛發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。不同空氣潔凈度級(jí)別使用的工作服應(yīng)當(dāng)分別清洗、整理，必要時(shí)消毒或滅菌。工作服洗滌、滅菌時(shí)不應(yīng)帶入附加的顆粒物質(zhì)。工作服應(yīng)制定清洗周期。
進(jìn)入各個(gè)區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開時(shí)，不得將工作服帶出。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立、執(zhí)行人員進(jìn)出潔凈區(qū)的清潔程序和管理制度，人員清潔程序合理。
十、人員培訓(xùn)
配備至少兩名專業(yè)實(shí)驗(yàn)員，能夠處理樣品、提取核酸及核酸擴(kuò)增，熟練掌握超凈工作臺(tái)、生物安全柜、自動(dòng)提取儀、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的使用，加強(qiáng)生物安全方面的培訓(xùn)，避免實(shí)驗(yàn)室污染。
一、什么是 PCR 實(shí)驗(yàn)室
PCR 是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)也可以 當(dāng)作一項(xiàng)其重要的酶促合成 DNA 技術(shù)。PCR 又稱為無(wú)細(xì)胞克隆系統(tǒng)或特異性 DNA 序列體外引物定向酶促擴(kuò)增法，是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新，它可將微量的靶 DNA 特異地?cái)U(kuò)增 上百萬(wàn)倍。
聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）是在 DNA 聚合酶催化下，以母鏈 DNA 為模板以特定引物為延伸起
點(diǎn)，通過變性、退火、延伸等步驟，體外復(fù)制出與母鏈模板 DNA 互補(bǔ)的子鏈 DNA 的過程。是 一項(xiàng) DNA 體外合成放大技術(shù)，能快速特異地在體外擴(kuò)增任何目的 DNA?？捎糜诨蚍蛛x克隆，序列分析，基因表達(dá)調(diào)控，基因多態(tài)性研究等許多方面。
一對(duì)合成 DNA 的引物經(jīng)過高溫變性、低溫退火和中溫延伸三個(gè)階段為一個(gè)循環(huán),每一次循環(huán)使特異區(qū)段的基因拷貝數(shù)放大一倍,一般樣品是經(jīng)過 30 次循環(huán),終使基因放大了數(shù)百萬(wàn)倍; 將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳,經(jīng)溴化乙錠染色,在紫外燈照射下肉眼能見到擴(kuò)增特異區(qū)段的 DNA 帶。
二、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則
1、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的選址：
符合檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)規(guī)定，具體適用于屠宰場(chǎng)來說，可選擇辦公樓或者的實(shí)驗(yàn)室空間，選址不能和屠宰線相通，如果實(shí)驗(yàn)室陽(yáng)性對(duì)照污染，會(huì)污染整個(gè)屠宰生產(chǎn)線，勢(shì)必對(duì)屠宰場(chǎng)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
個(gè)別不專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造公司因?yàn)椴涣私夥侵挢i瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)流程，造成設(shè)計(jì)布局不合理，對(duì)后期開展工作造成很大的不便及生物安全隱患。
2、主體結(jié)構(gòu)：
目前實(shí)驗(yàn)室的主體多為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金R50內(nèi)角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。并且彩鋼板結(jié)構(gòu)牢固，線條簡(jiǎn)明，美觀大方，密封性好。
3、標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：
將 PCR 過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和 PCR 擴(kuò)增區(qū)及產(chǎn)物分析檢測(cè)區(qū)四個(gè)的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時(shí)各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)， 使整個(gè) PCR 實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
另外：
PCR 實(shí)驗(yàn)室根據(jù)使用儀器的功能合理設(shè)置各個(gè)工作區(qū)域，如采用聚合酶聯(lián)反應(yīng)：則設(shè)置試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域，這是
常用的分區(qū)方式。樣品需要粉碎處理的，還需增設(shè)樣品粉碎區(qū)；若使用實(shí)時(shí)熒光 PCR 法：基因擴(kuò)增區(qū)、基因產(chǎn)物分析區(qū)可以合并在一個(gè)房間內(nèi)；采用標(biāo)本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的全自動(dòng)化 PCR 分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個(gè)區(qū)域，因此 PCR 實(shí)驗(yàn)室原則上設(shè)置五個(gè)區(qū)或四個(gè)區(qū)或三個(gè)區(qū)或二個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)。
核酸擴(kuò)增前區(qū)和核酸擴(kuò)增后區(qū)可設(shè)在一個(gè)房間內(nèi)，但必須在滿足下列要求的前提下：
a. 核酸擴(kuò)增前區(qū)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)置兩個(gè)不同位置的實(shí)驗(yàn)區(qū)，試劑配置在超凈工作臺(tái)中操作，樣品處理在生物安全柜內(nèi)操作。
b. 在核酸擴(kuò)增后區(qū)使用全封閉的擴(kuò)增和檢測(cè)系統(tǒng)，如實(shí)時(shí)熒光 PCR 儀等。
c. 每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員使用各自的試劑、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。
d. 在實(shí)驗(yàn)前后對(duì)操作區(qū)域和共享器具進(jìn)行清潔及消毒。
e. 各區(qū)域的試劑、器具、儀器和設(shè)備為該區(qū)專用，不得交叉使用。
4、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的布局：
非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室用的儀器為熒光定量PCR，因此核酸擴(kuò)增和分析在一個(gè)區(qū)，實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)需要如下功能房間：PCR緩存走廊、帶緩存間的配液室、帶緩存間的樣品處理室、帶緩存間的核酸擴(kuò)增分析區(qū)及實(shí)驗(yàn)室用具消毒室。
5、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室生物安全保護(hù)：
理論上講非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室是BSL-2 生物安全實(shí)驗(yàn)室，需要配置二級(jí)生物安全柜，推薦選擇70%外排，30%內(nèi)循環(huán)，各功能房間緩存設(shè)置衣柜和消毒器，各區(qū)的實(shí)驗(yàn)服專用，物料流通需要配置帶紫外線的互鎖的傳遞窗，實(shí)行人流物流分開設(shè)置。
6、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室消毒：
在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。
在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈，對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。
7、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗：
試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過程中不受污染（人物分流）。
8、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室地面
地面建議使用 PVC 卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少 800mm×800mm）接縫需要小于 2mm。
9、非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室照明
燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。
三、空氣流與壓差要求
PCR 實(shí)驗(yàn)室的空氣流向必須嚴(yán)格按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進(jìn)行，防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。風(fēng)速流向不得混亂。
為了保證房間內(nèi)的壓差和避免污染，應(yīng)在空調(diào)面板處寫清楚送風(fēng)機(jī)和排風(fēng)機(jī)的開啟順序和關(guān)閉順序，先后順序不得混亂。
空氣潔凈級(jí)別不同的相鄰房間之間的靜壓差應(yīng)大于 5 帕，潔凈室(區(qū))與室外大氣的靜壓差應(yīng)大于 10 帕，應(yīng)配備監(jiān)測(cè)靜壓差的設(shè)備，并定期監(jiān)控。
一般情況下，試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染；可以通過控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。
核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。
在理想情況下，PCR 實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。PCR 實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制的要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到定點(diǎn)。
四、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施要求：
實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)施設(shè)計(jì)：包括實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)裝修、實(shí)驗(yàn)室凈化工程、實(shí)驗(yàn)室供排水工程、實(shí)驗(yàn)室電路系統(tǒng)。
1、實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)裝修需要潔凈天花、地板、隔斷，合理設(shè)置緩存間及配置凈化門、觀察窗、傳遞窗等。
2、實(shí)驗(yàn)室凈化工程 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備單獨(dú)送排風(fēng)設(shè)施，試劑配置區(qū)、核酸提取區(qū)和擴(kuò)增分析區(qū)應(yīng)配備凈化系統(tǒng)。
3、實(shí)驗(yàn)室供排水工程包括非手動(dòng)水龍頭、不銹鋼或PP水池和緊急淋浴器及供排水管線管路。
4、實(shí)驗(yàn)室電路系統(tǒng):根據(jù)儀器的功率配置合適的功率，特別注意高壓滅菌鍋的功率，注意實(shí)驗(yàn)室用電安全。
5、配備適用的應(yīng)急器材，如應(yīng)急照明設(shè)備、消防器材、意外事故處理器材等。
五、實(shí)驗(yàn)室儀器及設(shè)備
1、衣室儀器及設(shè)備：衣柜或掛衣架、鞋柜以及消毒器和烘干器。
2、配液室儀器及設(shè)備：超凈工作臺(tái)、冰箱、小型離心機(jī)、旋渦振蕩器、微量移液器等。
3、樣品處理室儀器及設(shè)備：離心機(jī)、組織研磨機(jī)、Ⅱ級(jí)生物安全柜、恒溫水浴鍋、冰柜等、可移動(dòng)紫外消毒器。
4、核酸提取室儀器及設(shè)備：核酸提取儀、Ⅱ級(jí)生物安全柜、恒溫水浴鍋、小型離心機(jī)、微量移液器、可移動(dòng)紫外消毒器等。
5、擴(kuò)增分析區(qū)儀器及設(shè)備：熒光定量pcr儀、電腦、打印機(jī)、不間斷電源、可移動(dòng)紫外消毒器等。
6、消毒洗滌室：高壓滅菌器、干燥箱、器皿柜等。
六、實(shí)驗(yàn)室面積及設(shè)備間距
一般來說各房間的面積沒有嚴(yán)格要求，只需能放置所需儀器設(shè)備，并且便于人員操作即可，但是有生物安全柜的房間面積不能小于10平米，并且每增加一臺(tái)生物安全柜，房間就要增加 10 平米。各實(shí)驗(yàn)室緩沖間的面積一般為 1300*（1300 或 1500）mm 為宜，并且緩沖間的面積不能 大于實(shí)驗(yàn)室房間面積的 1/8。
在做平面設(shè)計(jì)的時(shí)候，先要考慮的因素是就是“安全”，實(shí)驗(yàn)室是易發(fā)生爆炸、火災(zāi)、毒氣泄露等的場(chǎng)所。我們?cè)谧銎矫嬖O(shè)計(jì)的時(shí)候，應(yīng)盡量地要保持實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)流暢、逃生通道暢通。根據(jù)人體工程學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)。我們做如下的劃分以供參照：
實(shí)驗(yàn)臺(tái)與實(shí)驗(yàn)臺(tái)通道劃分標(biāo)準(zhǔn)(通道間隔用 L 表示)
L>500mm 時(shí)，一邊可站人操作；
L>800mm 時(shí)，一邊可坐人操作；
L>1200mm 時(shí)，一邊可坐人，一邊可站人，中間不可過人;
L>1500mm 時(shí)，兩邊可坐人，中間可過人；
L>1800mm 時(shí)，兩邊可坐人，中間可過人可過儀器
天平臺(tái)、儀器臺(tái)不宜離墻太近，離墻 400mm 為宜。為了在工作發(fā)生危險(xiǎn)時(shí)易于疏散，實(shí)驗(yàn)臺(tái)間的過道應(yīng)全部通向走廊。另:實(shí)驗(yàn)室建筑層高宜為 3.7 米-4.0 米為宜，凈高宜為2.7米-2.8 米，有潔凈度、壓力梯度、恒溫恒濕等特殊要求的實(shí)驗(yàn)室凈高宜為 2.5 米-2.7 米（不包括吊頂）；實(shí)驗(yàn)室走廊凈寬宜為 2.5 米-3.0 米.普通實(shí)驗(yàn)室雙門寬以 1.1 米-1.5 米(不對(duì)稱對(duì)開門)為宜,單門寬以 0.8 米-0.9 米為宜。
七、潔凈裝修要求
潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表面應(yīng)平整光滑、無(wú)裂縫、接口嚴(yán)密、無(wú)顆粒物脫落，并能耐受清洗
和消毒，墻壁與地面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少灰塵積聚和便于清潔。
潔凈室(區(qū))內(nèi)各種管道、燈具、風(fēng)口以及其他公用設(shè)施，在設(shè)計(jì)和安裝時(shí)應(yīng)考慮使用中
避免出現(xiàn)不易清潔的部位。
潔凈室(區(qū))的窗戶、天棚及進(jìn)入室內(nèi)的管道、風(fēng)口、燈具與墻壁或天棚的連接部位均應(yīng)
密封。
八、人流路徑與物流路徑
進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑：
公共清潔區(qū)——衣間（換潔凈服）——緩沖間——污染實(shí)驗(yàn)區(qū)
工作人員退出實(shí)驗(yàn)室的路徑為：
污染試驗(yàn)區(qū)——緩沖間——淋浴間（有條件的可設(shè)置）——衣間——公共清潔區(qū)
所有的物品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)必須經(jīng)過雙扉互鎖傳遞窗，利用傳遞窗消毒后才可進(jìn)入，實(shí)驗(yàn)室
內(nèi)所有物品的也必須經(jīng)過傳遞窗才可以傳遞到實(shí)驗(yàn)室以外的清潔公共區(qū)。
門的開啟方向
實(shí)驗(yàn)室建筑層高宜為 3.7 米-4.0 米為宜，PCR 實(shí)驗(yàn)室凈高宜為 2.5 米-2.7 米（不包括吊頂）；實(shí)驗(yàn)室走廊凈寬宜為 2.5 米-3.0 米.普通實(shí)驗(yàn)室雙門寬以 1.1 米-1.5 米(不對(duì)稱對(duì)開門)為宜,單門寬以 0.8 米-0.9 米為宜。
一般實(shí)驗(yàn)室門主要向里開，但如有危險(xiǎn)的房間，房門應(yīng)朝外開，房門材質(zhì)好選擇壓力
玻璃。
有壓差梯度的房間，門的開啟方向應(yīng)朝向正壓方向一側(cè)開啟；
考慮到消防安全，對(duì)于那些主要逃生門的開啟方向應(yīng)朝向清潔區(qū)方向開啟。
九、工作服要求
在凈化車間內(nèi)工作的人員應(yīng)穿著符合要求的工作服。工作服的選材、式樣及穿戴方式應(yīng)與生產(chǎn)操作和空氣潔凈度級(jí)別要求相適應(yīng)，并不得混用。潔凈工作服的質(zhì)地應(yīng)光滑、不產(chǎn)生靜電、不脫落纖維和顆粒性物質(zhì)。無(wú)菌工作服必須包蓋全部毛發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。不同空氣潔凈度級(jí)別使用的工作服應(yīng)當(dāng)分別清洗、整理，必要時(shí)消毒或滅菌。工作服洗滌、滅菌時(shí)不應(yīng)帶入附加的顆粒物質(zhì)。工作服應(yīng)制定清洗周期。
進(jìn)入各個(gè)區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開時(shí)，不得將工作服帶出。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立、執(zhí)行人員進(jìn)出潔凈區(qū)的清潔程序和管理制度，人員清潔程序合理。
十、人員培訓(xùn)
配備至少兩名專業(yè)實(shí)驗(yàn)員，能夠處理樣品、提取核酸及核酸擴(kuò)增，熟練掌握超凈工作臺(tái)、生物安全柜、自動(dòng)提取儀、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的使用，加強(qiáng)生物安全方面的培訓(xùn)，避免實(shí)驗(yàn)室污染。
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